Inmunofluorescencia
¿Qué es la inmunofluorescencia?
La inmunofluorescencia es un conjunto de técnicas diagnósticas que recurren al uso de sustancias fluorescentes, fluorocromos, que permiten detectar la presencia de un antígeno o anticuerpo en células o tejidos.
Se recurre a esta técnica, sobre todo, para el diagnóstico de enfermedades autoinmunes.
¿En qué consiste?
La inmunofluorescencia actúa siguiendo 4 pasos claves:
- Fijación: se preserva la localización, composición y estructura del material biológico.
- Permeabilización: se produce poros en las membranas celulares permitiendo el ingreso de los anticuerpos a la célula.
- Bloqueo: el objetivo es impedir interacciones inespecíficas de los anticuerpos con el material biológico a analizar. De esta manera se reduce la marcación inespecífica.
- Inmunodetección: en este último paso se diferencian dos tipos de inmunofluorescencia: directa o indirecta.
Inmunofluorescencia: directa e indirecta
Principalmente, se recurre a la inmunofluorescencia para diagnosticar enfermedades de tipo autoinmunitario. Es decir, aquellas en las que las propias defensas del cuerpo atacan a algún órgano de nuestro organismo.
En el caso de la inmunofluorescencia directa, el fluorocromo se conjuga directamente con el anticuerpo primario.
Por otro lado, en la inmunofluorescencia indirecta los anticuerpos específicos no marcados se unen al antígeno y, en una segunda etapa, se agrega el anticuerpo marcado como fluorocromo. A diferencia de la inmunofluorescencia directa, el fluorocromo se conjuga con un anticuerpo secundario dirigido contra el anticuerpo primario.
Esta prueba, además, tiene una sensibilidad mayor que la inmunofluorescencia directa.
¿Para qué sirve?
Sirve para que el especialista en Anatomía Patológica determine la presencia y distribución de proteínas, glúcidos o pequeñas moléculas y puede ser utilizada en cortes de tejidos, células individuales y secreciones con células en suspensión. La inmunofluorescencia se puede combinar con otras técnicas que no hagan uso de anticuerpos.
Por último, conviene señalar que es una técnica que puede aplicarse tanto en muestras de origen biológico como en muestras no biológicas.